Загальний опис. Хромогенний
підкладка, яка зазнає характерної зміни кольору жовтий (λмакс = 390 нм при pH 7,0) до червоного (λмакс = 486 нм при pH 7,0) оскільки амідний зв’язок у β-лактамному кільці гідролізується β-лактамазою.
Оскільки амідний зв'язок у бета-лактамному кільці гідролізується бета-лактамазою, нітроцефін змінює колір з жовтого на червоний. Бактерії, які виробляють бета-лактамазу у значних кількостях, викликають зміну кольору Nitrocef Disk™ з жовтого на червоний.
Тест на хромогенні цефалоспорини (нітроцефін) — біохімічний тест, який є чутливим методом виявлення штами N., що продукують бета-лактамазу. гонорея, H. грип, Staphylococcus spp, Enterococcus spp та Moraxella catarrhalis.
Нітроцефін є бета-лактамним антибіотиком, з діагностичними властивостями. Нітроцефін чутливий до гідролізу всіма лактамазами, що продукуються грампозитивними та грамнегативними бактеріями.
Приготування розчину нітроцефіну (500 мкг/мл). Розчиніть 1 мг нітроцефіну в 100 мкл диметилсульфоксиду (ДМСО) і перемішайте на вортексі.. Додайте 1,9 мл фосфатного буфера (100 мМ, pH 7), щоб отримати 2 мл загального об’єму.
Нітроцефін є хромогенний цефалоспориновий субстрат, який використовується для виявлення присутності ферментів бета-лактамази, важливий медіатор стійкості бактерій до антибіотиків. Хоча існують інші методи виявлення, такі як ПЛР, нітроцефін дозволяє швидко виявити за допомогою невеликої кількості матеріалів і недорогого обладнання.
Активність βL вимірюється шляхом гідролізу хромогенного цефалоспорину під назвою нітроцефін, утворюючи колориметричний продукт з максимумом поглинання при 490 нм пропорційно наявній ферментативній активності.